熒光定量專用的0.2ml離心管有什麼特性
- 2022-03-26
實時熒光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應(PCR)迴圈後產物
所謂實時熒光定量PCR技術[1] ,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個PCR程序,最後透過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
技術原理
將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合後,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱迴圈,並遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素遊離於反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著迴圈次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,透過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光訊號強度,求得Ct值,同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的複製數。
Ct 值
Ct值(Cycle threshold,迴圈閾值)的含義為:每個反應管內的熒光訊號到達設定閾值時所經歷的迴圈數
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