TA00399 2016-05-11

文久二年（1862年）， 近藤一度獲得了講武所劍術教授的機會。不過終因農民出身的身份而沒有被正式採用。

文久三年（1863年），率試衛館天然理心流門人加盟進京浪士組。浪士組解散後殘留京都，成為京都守護松平容保下屬，並與芹澤鴨一派共同成立“新撰組”。響應幕府號召，募集浪人組織新撰組，暗殺前輩和同僚，肅正芹澤鴨與新見錦一派後，近藤勇出任新撰組局長一職，負責取締尊攘派志士的工作。

元治元年（1864年）六月五日，長州激進派維新志士在京都二條池田屋密謀火燒京都，趁亂暗殺佐幕派人物。不料訊息洩露，近藤勇率新撰組進攻池田屋，將與會人物一網打盡，令長州派大傷元氣。因為池田屋事件，新撰組一戰成名，成為鎮壓尊攘派志士的急先鋒。

慶應四年（1868年），戊辰戰爭爆發。京都伏見鳥羽一戰，幕府軍大敗，逃往江戶，組織甲陽鎮撫隊。在甲裴勝沼、下總國流山一戰中，為掩護其他新撰組隊員及同志撤離，近藤勇向維新政府軍投降。因為當時幕府是維新政府“朝敵”，近藤勇投降後，當局不許近藤勇以武士身份切腹自盡，而判其斬首，同年4月處斬。

慶應四年四月二十五日，在板橋平尾一里冢，近藤勇被斬首，時年三十五歲（虛歲）。