冷落清秋2017.04.20 回答

1，檢查抗體是否過期，儲存方法是否正確，稀釋比例是否正確。

2，抗體的孵育時間、溫度是否正確。

3，洗滌液中是否含有triton-100等破膜物質。

4，洗滌時間是否過長。

5，排除所有人為因素，考慮該細胞可能確實不表達該蛋白。

心的嚮往2017.04.18 回答

細胞免疫熒光的詳細操作步驟 1，取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿裡，pbs洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心。 2，4%多聚甲醛固定20分鐘，pbs洗三遍。 3，0。2%triton x 100通透10分鐘，pbs洗三遍。