分光光度法測量時最佳的吸光度範圍是多少,如何是使由於讀數而產生的測量誤差?

  • 作者:由 匿名使用者 發表于 動漫
  • 2022-03-25

分光光度法測量時最佳的吸光度範圍是多少,如何是使由於讀數而產生的測量誤差? 熱心問友 1級 2022-02-17 回答

分光光度計採用可產生多個波長的光源,透過分光裝置,從而產生特定波長光源,透過測試的樣品後,部分光線被吸收,計算樣品吸光值,從而轉化成樣品濃度。樣品吸光值濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度成正比。那麼分光光度計的最佳讀取範圍是多少呢?

分光光度計常用的演算法如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc,式中A為吸光度;I0為入射的單色光強度;I為透射的單色光強度;T為物質的透射率;L為被分析物質的光程;c為物質的濃度;k為摩爾吸收係數。對於較先進的紫外可見分光光度計,T測量的絕對誤差主要受檢測器的散粒效應影響,光電檢測器噪聲近似訊號強度的平方根,即△T=KT1/2。

當T=0。135時,測量的相對誤差最小。先進儀器自身△T也較小,一般吸光度在0。1-2。0之間,就能保證測量精密度在0。5%之內。若讀數超出上述的範圍,那麼讀取的相對誤差會迅速的增大。與傳統的普及型和中等效能的分光光度計,T測量的讀數誤差主要受熱噪聲或電子噪聲影響,不隨T本身而變化,約在0。002-0。01的範圍。解得T=0。368,所以說,當T=0。368時,測量的相對誤差是最小的,也就是說分光光度計在這個時候的讀取結果是最準的。

又因為吸光度在分光光度計上的錶盤讀數是按照對數尺度刻分的。那麼經過一些列的相關實驗已經證實,當吸光度在0。2-0。8的範圍內的時候,讀取的讀數的誤差是最小的。我們在進行實驗的時候,可以調整標樣和待測樣的濃度使其吸收正好落在這一範圍內。所以,分光光度計最佳讀取範圍是吸光度在0。2-0。8的時候。

Top