熒光絕對定量中標準品指的是什麼,如何獲取

  • 作者:由 匿名使用者 發表于 舞蹈
  • 2022-10-13

熒光絕對定量中標準品指的是什麼,如何獲取伍先生2017.01.14 回答

熒光絕對定量中標準品:指用含有目的基因的質粒,知道質粒的分子量和濃度計算出複製數,然後倍比稀釋就作為絕對定量的標準品。

獲取:把目的基因p出來,然後接到質粒上,轉染搖菌擴增,然後再抽質粒,酶切純化。最後把純化的目的基因做個鑑定。然後測定目的基因的量,計算出複製數。

熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術,它是透過熒光染料或熒游標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時線上監控反應過程,結合相應的軟體可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。

PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光訊號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光訊號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光訊號的累積與PCR產物形成完全同步。

熒光絕對定量中標準品指的是什麼,如何獲取一網天下2017.01.14 回答

啥叫熒光定量標準品?

一般都是核酸標準品,如果你問的是核酸標準品的話,中國食品要鑑定研究院有賣。當然也要看你是什麼專案,常規專案會有

熒光絕對定量中標準品指的是什麼,如何獲取匿名使用者2017.01.14 回答

標準品指的是已知複製數的核酸,簡單點說就是已知量的DNA。

獲取方法是透過一些儀器及方法測得DNA含量,換算成複製數,再進行梯度稀釋,即可得到標準品

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