檢驗DNA和RNA時,用的甲基綠和吡羅紅咋配備?

  • 作者:由 匿名使用者 發表于 遊戲
  • 2021-10-04

檢驗DNA和RNA時,用的甲基綠和吡羅紅咋配備? 匿名使用者 1級 2018-11-20 回答

如果化學試劑商店沒有吡羅紅甲基綠混裝粉,可以分別購買甲基綠和吡羅紅G(注意:用於核酸染色的是吡羅紅G,請不要錯買吡羅紅B),然後按以下方法配製。

①染色劑A液的配製方法 取甲基綠2 g溶於98 mL蒸餾水中,取吡羅紅G 5 g溶於95 mL蒸餾水中。取6 mL甲基綠溶液和2 mL吡羅紅溶液加入到16 mL蒸餾水中,即為A液,放入棕色瓶中備用。

②染色劑B液的配製方法 B液是一種緩衝液,由乙酸鈉和乙酸混合而成。先取乙酸鈉16。4 g,用蒸餾水溶解至1 000 mL備用;再取乙酸12 mL,用蒸餾水稀釋至1 000 mL備用。取配好的乙酸鈉溶液30 mL和稀釋的乙酸20 mL,加蒸餾水50 mL,配成pH為4。8的B液。

③染色劑的配製 染色劑是由A液、B液混合配製而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合,就是實驗中所用的吡羅紅甲基綠染色劑。應該注意的是該試劑應現用現配。

檢驗DNA和RNA時,用的甲基綠和吡羅紅咋配備? 輕柔的風 1級 2018-11-20 回答

1、原理與解析

(1)真核細胞的dna主要分佈在細胞核內,rna主要分佈在細胞質中。

(2)甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對dna和rna的親和力不同,甲基綠對dna親和力強,使dna顯現出綠色,而吡羅紅對rna的親和力強,使rna呈現出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細胞染色,可同時顯示dna和rna在細胞中的分佈。

(3)鹽酸的作用

① 鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運輸;

② 鹽酸使染色體中的dna與蛋白質分離,便於dna與染色劑的結合。

注意事項?

1。材料的選擇

① 選用的實驗材料既要容易獲得,又要便於觀察;

② 常用的觀察材料由人的口腔上皮細胞、洋蔥鱗片葉表皮細胞(為避免原有顏色的干擾,不可使用紫色表皮細胞)

2。取材要點

① 取口腔上皮細胞之前,應先漱口,以避免裝片中出現太多的雜質;

② 取洋蔥表皮細胞時,儘量避免材料上帶有葉肉組織細胞。

3。沖洗載玻片時水的流速要儘量慢,切忌直接用水龍頭沖洗。?

4。安全要點?

① 用酒精燈烘烤載玻片時,不要只集中於材料處,而應將載玻片在火焰上來回移動,使載玻片均勻受熱,以免破裂;

② 烘烤後的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。

5。換用高倍鏡觀察材料時,只能用細準焦螺旋進行調焦,切不可動粗準焦螺旋。

主要步驟(以觀察口腔上皮細胞為例)

1。取材?

① 滴: 在潔淨的載玻片上滴一滴質量分數為0。9%的nacl溶液;?

② 刮: 用消毒牙籤在口腔內側壁上輕輕地刮幾下;?

③ 塗: 將牙籤上的碎屑塗抹在載玻片的生理鹽水中;?

④ 烘: 將塗有口腔上皮細胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘乾。?

2。水解

① 解: 將烘乾的載玻片放入裝有30ml質量分數為8%的鹽酸的小燒杯中,進行材料的水解;

② 保: 將小燒杯放入裝有30℃溫水的大燒杯中保溫5分鐘。?

3。沖洗塗片

① 衝: 用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10秒鐘;

② 吸: 用吸水紙吸去載玻片上的水分。

4。染色?

① 染:用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上,染色5分鐘;

② 吸: 吸去多餘染色劑;

③ 蓋: 蓋上蓋玻片。

5。觀察?

① 低: 在低倍物鏡下,尋找染色均勻,色澤淺的區域,移至視野中央,將物像調節清晰;

② 高: 轉到高倍物鏡,調節細準焦螺旋,觀察細胞核和細胞質的染色情況。

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