要過聚醯胺柱，誰知道幹態聚醯胺的保留體積是多少啊？

薄層色譜中拖尾的如何算它的RF值呢？如何與過柱相結合？

聚醯胺一定要預處理，起碼要 用乙醇泡過，柱子底下要墊脫脂棉，能快一些

我的聚醯胺流速超快！估計一個是粒度的問題，二是你的樣品問題。我先放了石頭在最底層，再放脫脂棉，再裝聚醯胺，流速非常快。

產品介紹：

質量指標：分子量：14000～17000比表面：5～10m2/g

PH值： 6~7

產品價格：30~60目 180元/KG60～100目 240元/KG100目以上 300元/KG

溶解度：溶於濃鹽酸，甲酸，微溶於醋酸，苯酚等溶劑，不溶於水，甲醇，乙醇，丙酮，乙醚，氯仿和苯等常用有機溶劑，對鹼較穩定，對酸的穩定性較差，尤其是無機酸，在溫度高時更敏感。

吸附原理：

聚醯胺是由醯胺鍵聚合形成的高分子化合物。其醯胺基可與羥基酚類，酸類，醌類，硝基等化合物以氫鍵形成結合而被吸附 ，其脂肪長鏈可作為分配層析的載體。聚醯胺在含水系統中層析時，聚醯胺作為非極性固定相，其層析行為反向柱層析；在非水溶劑系統時，聚醯胺作為分配層析的載體，其層析行為為正向柱層析。

應用範圍：

聚醯胺特別適應於多元酚類化合物的分離，如黃酮、醌類、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。

例如：葛根素中提取葛根黃酮、茶葉提取茶多酚、 人參中提取人參皂苷、銀杏葉中提取銀杏黃酮、甘 草中提取甘草皂苷、甜葉菊中提取甜菊苷、發酵液中提取維生素和抗生素等成份

對鞣質吸附強，用於將植物粗提物中的鞣質除去。

前處理：

新買的聚醯胺

取聚醯胺以90-95%乙醇浸泡，不斷攪拌，除去氣泡後裝入柱中。用3-4倍體積的90-95%乙醇洗脫，洗至洗脫液透明並在蒸乾後無殘渣（或極少殘渣）。再依次用2-2。5倍體積5%NaOH水溶液、1倍體積的蒸餾水、2-2。5倍體積的10%醋酸水溶液洗脫，最後用蒸餾水洗脫至pH中性，備用。

用過的聚醯胺

一般用5%NaOH水溶液洗脫，洗至NaOH水溶液顏色極淡為止。有時因某些鞣質與聚醯胺又不可逆吸附，用NaOH水溶液很難洗脫，可用5%NaOH在柱中浸泡，每天將柱中的NaOH水溶液放出一次，並加入新的5%NaOH水溶液，這樣浸泡一週後，鞣質可基本洗脫完。然後用蒸餾水洗脫至pH8-9，再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脫，最後蒸餾水洗脫至pH中性，重複使用。

聚醯胺吸附法的操作：

1、裝柱：一般將顆粒狀聚醯胺混懸於水中，使其充分膨脹，然後裝柱，讓聚醯胺自由沉降；當用非極性溶劑系統時候，則用組分中低階性的溶劑裝柱。

2、稀釋適當濃度上樣：一般每100ml聚醯胺上樣1。5-2。5g，樣品先用洗脫溶劑溶解，濃度為20%-30%。水溶性化合物直接上樣；若提取物水溶性不好，則用揮發性有機溶媒溶解、拌適量聚醯胺、揮幹或減壓蒸乾、幹法裝入柱頂。

3、水洗：先用水洗脫。

4、醇洗：在水中遞增乙醇濃度至濃乙醇溶液，或氯仿、氯仿-甲醇，遞增甲醇至純甲醇洗脫。若仍有物質未被洗脫，可用稀氨水或稀甲醯胺溶液洗脫，分段收集。

5、找到最佳吸附比：先小量試驗找到最佳吸附比。

6、放大：根據小試及最佳吸附比進行放大試驗。

7、聚醯胺的回收：使用過的聚醯胺一般用5%氫氧化鈉溶液洗滌，然後水洗，再用10%醋酸液洗，然後用蒸餾水洗至中性，即可。

對於分離黃酮類化合物來說，聚醯胺是較理想的吸附劑。其吸附強度主要取決於黃酮類化合物分子中的羥基數目與位置。一般有以下規律：

1、苷元相同，連線糖越多，吸附力越大，流出越慢。

2、母核上增加羥基，洗脫速度相應減緩。

3、對位、間位酚羥基使吸附能力 〉鄰位酚羥基。

4、不同型別的黃酮的流出順序一般是：異黃酮 〉二氫黃酮醇〉黃酮 〉黃酮醇。

5、分子中芳香核、共軛雙鍵多者則吸附力強，晚出柱。

6、若形成分子內氫鍵則吸附力減弱。

含水系統洗脫能力：鹼液>甲醇>水

溶劑洗脫能力與溶劑極性相關可使化合物得到較好的分離。

選擇系統時，可以將樣品加入上述溶劑系統中，觀察樣品在聚醯胺薄膜的層析行為，然後確定溶劑系統。

聚醯胺與大孔樹脂的區別：

吸附原理不同：大孔樹脂是物理吸附原理；聚醯胺是化學吸附原理，氫鍵吸附，用於酚類、黃酮類、醌類成分的分離。

大孔樹脂的分離效果沒有聚醯胺好。若是粗粉可以用大孔樹脂進行分段，聚醯胺可用於黃酮類成分的細分或純化。

聚醯胺樹脂可以使用其幹柱層析功能，在分離黃酮的過程中作用也是很大的，而大孔樹脂則沒有此功能。

聚醯胺樹脂可以首先用聚醯胺薄膜展開系統，而大孔樹脂沒有薄層

樹脂進行新藥研發，其新藥若用大孔樹脂製備，必須有打孔的殘留檢查，而聚醯胺目前還沒有正式的檔案要檢查其殘留

聚醯胺上樣時，其樣品中的鞣質會對主子產生死吸附，大孔出現這種現象很少

大孔的可選擇型別比聚醯胺多，而且還增加了許多鍵合型別，如ASD型，其鍵合了醯胺鍵，增加了其選擇性。

聚醯胺的不足及解決方案：

聚醯胺柱層析的不足：

比如機械強度不大，

粒度不均勻，分離時流速較慢

一些小分子雜質混入的問題

採用的解決方案有：

1。裝柱前先過篩

2。裝柱時用5%甲醇或10%鹽酸預先除去小分子雜質

3。與矽藻土混合制粒以增加機械強度。