中國農業出版社 2019-01-31

所謂的無菌操作，是指接種操作的空間、使用的器皿和工具、操作的衣著和手，不能沾染任何活的微生物，以保證接種材料不沾染雜菌的整個接種操作過程，也是菌種分離、轉擴中的重要技術環節之一。其具體操作如下：

（1）接種前必須使待接種物冷卻到適宜溫度（28～30℃）防止高溫接種熱死菌種。同時要對接種箱（室）進行清潔消毒，並準備好接種工具。

（2）將已滅菌冷卻過的待接種物（試管、瓶、袋）及各種需有物品提前搬入接種箱（室）內，用藥物燻蒸，有條件的可用紫外線燈滅菌20～30分鐘或用環境消毒器滅菌30分鐘，效果會更好。

（3）接種人員在操作前穿上無菌工作服、工作鞋，帶好口罩和工作帽，若沒有的也可以換一套清潔的衣服。再用新潔而滅溶液表面消毒，同時用消毒液洗手，然後帶菌種或分離物進入接種室（箱）。

（4）接種操作前，用70%酒精棉球擦手、菌種容器表面、工作臺面及接種工具，再點燃酒精燈開始接種操作。操作時，要思想集中，嚴格認真，動作要輕，儘量減少空氣流動。

（5）接種結束，及時搬出所有物品，收拾乾淨。若要連續使用，必須重新進行全面的消毒滅菌。